为了确保血琼脂培养基的质量稳定性和实验结果的准确性,特制定本标准操作规程(SOP)。该规程适用于实验室中血琼脂培养基的配制过程,旨在为微生物学研究提供可靠的基础支持。
一、适用范围
本规程适用于临床检验、食品检测及环境监测等领域中血琼脂培养基的配制工作。
二、所需材料与设备
1. 基础成分:
- 胰蛋白胨:5g
- 酵母浸粉:3g
- 氯化钠:5g
- 琼脂粉:15g
- 蒸馏水:1000ml
2. 补充成分:
- 新鲜牛血或羊血:50ml
3. 设备:
- 分析天平(精度0.01g)
- 烧杯(1L)
- 磁力搅拌器
- pH计
- 高压蒸汽灭菌锅
- 无菌操作台
三、操作步骤
1. 称量与溶解
使用分析天平精确称取上述基础成分,并加入烧杯中。随后向烧杯内加入蒸馏水,开启磁力搅拌器进行充分溶解,直至完全均匀。
2. 调节pH值
使用pH计检测溶液的酸碱度,将其调整至7.2-7.4之间。如需调整,则通过添加稀盐酸或氢氧化钠实现。
3. 加入血液
在溶液冷却至45℃左右时,将新鲜血液缓慢倒入其中,并轻轻搅拌混合均匀。注意避免产生气泡。
4. 灭菌处理
将配制好的混合液转移至耐热容器中,放入高压蒸汽灭菌锅内,在121℃条件下灭菌15分钟。灭菌完成后,待其自然冷却备用。
5. 分装与储存
将灭菌后的液体迅速分装到无菌培养皿中,每皿约15ml左右。密封后置于冰箱冷藏室(2-8℃)保存,有效期不超过两周。
四、注意事项
- 整个操作过程必须在符合洁净级别的环境中完成,防止外界污染。
- 血液样品应选用新鲜采集且经过质量检验的产品。
- 若发现培养基出现浑浊或其他异常现象,请勿使用。
通过严格执行以上规程,可以有效保证血琼脂培养基的质量,从而提高实验数据的可信度和可靠性。