【SDS（mdash及PAGE凝胶电泳）】在生物化学与分子生物学研究中，SDS–PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）是一种广泛使用的蛋白质分离技术。它能够根据蛋白质的分子量大小对样品进行有效分离，是研究蛋白质结构、纯度及表达水平的重要工具。

SDS–PAGE的基本原理是利用聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质，在电场作用下使带电的蛋白质分子迁移。其中，SDS（十二烷基硫酸钠）是一种阴离子去污剂，它能破坏蛋白质的天然构象，并使其带上均匀的负电荷。这样，蛋白质在电泳过程中主要依据其分子量大小进行迁移，而不再受原有电荷或形状的影响。

实验操作中，首先需要制备不同浓度的丙烯酰胺和交联剂（如N,N’-亚甲基双丙烯酰胺），以形成具有不同孔径的凝胶层。通常，分离胶用于确定蛋白质的分子量，而浓缩胶则有助于将样品集中在一个较小的区域内，提高分辨率。

在上样前，样品需经过煮沸处理，以确保SDS充分结合到蛋白质上，并使蛋白质完全变性。同时，加入还原剂（如β-巯基乙醇或DTT）可以断裂二硫键，进一步保证蛋白质的线性化。

电泳完成后，通常使用考马斯亮蓝染色或银染等方法对凝胶进行显影，从而观察蛋白质条带的位置和强度。通过与已知分子量的标准蛋白比较，可以估算目标蛋白的分子量。

SDS–PAGE不仅适用于常规的蛋白质分析，还常与其他技术（如Western blot）联用，用于检测特定蛋白的存在与表达水平。此外，该方法也广泛应用于蛋白质纯化过程中的质量控制以及细胞裂解液成分的分析。

尽管SDS–PAGE具有操作简便、成本较低等优点，但也存在一定的局限性。例如，某些大分子量的蛋白质可能无法有效分离，或者在凝胶中发生扩散现象。因此，在实际应用中，研究人员往往需要根据实验目的选择合适的凝胶浓度和电泳条件，以获得最佳的分离效果。

总之，SDS–PAGE作为一种经典而实用的技术，仍然是现代生命科学研究中不可或缺的一部分。随着技术的不断进步，其在蛋白质组学、免疫学和药物开发等领域中的应用也将持续拓展。